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2021西医综合考研知识储备:生物化学(3)

2021-02-25

来源:昭昭医考

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2021考研复习拉开帷幕。考生可以结合《西方综合生物化学》复习笔记复习综合专业课,为以后复习打下坚实的基础。
动词(verb的缩写)蛋白质结构与功能的关系
1.蛋白质一级结构是空间构象和特定生物功能的基础。具有相似一级结构的多肽或蛋白质具有相似的空间构象和功能。
尿素或盐酸胍会破坏仲键
-巯基乙醇可以破坏二硫键
2.蛋白质的空间结构是蛋白质特殊性质和功能的结构基础。
肌红蛋白:只有三级结构的单链蛋白质,容易与氧结合,氧解离曲线为直角双曲线。
血红蛋白:它有4个亚单位组成的四级结构,能结合4个氧分子。成人由两条肽链(141个氨基酸残基)和两条肽链(146个氨基酸残基)组成。氧分压低时,与氧结合困难,氧解离曲线呈S型。因为:第一亚基与氧结合后,促进了第二、三亚基与氧的结合,而目前的三亚基与氧结合后,大大促进了第四亚基与氧的结合,称为正协同效应。与氧气结合后,由紧张状态变为放松状态。
不及物动词蛋白质的理化性质
1.蛋白质的两性离子化:在一定的溶液ph条件下,蛋白质两端的氨基和羧基以及侧链中的一些基团可以解离成带负电荷或正电荷的基团。
2.蛋白质沉淀:在适当条件下,蛋白质从溶液中沉淀出来的现象。包括:
A.丙酮沉淀破坏水合层。也可以使用乙醇。
b、盐析,即加入硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。以破坏水溶液中的稳定因子电荷并沉淀。
3.蛋白质变性:在某些理化因素的作用下,其特定的空间构象被破坏,导致其理化性质发生变化,生物活性丧失。主要是二硫键和非共价键的破坏,不涉及一级结构的改变。变性后溶解度降低,粘度增加,结晶能力消失,生物活性丧失,易被蛋白酶水解。导致变性的常见因素有:加热、有机溶剂如乙醇、强酸、强碱、重金属离子和生物碱试剂、超声波、紫外线、振动等。
4.蛋白质的紫外吸收:由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,在280nm处有一个特征吸收峰,可用蛋白质定量测定。
5.蛋白质的颜色反应
A.茚三酮反应:水解后产生的氨基酸可以进行这种反应,详见二、三
B.缩二脲试验:用稀碱溶液中的硫酸酮加热蛋白质和多肽分子中的肽键,显示紫色或红色。氨基酸没有这个反应。蛋白质水解增强,氨基酸浓度增加,缩二脲色深降低,可检测蛋白质水解程度。
七、蛋白质分离纯化
1、沉淀,见六
2.电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中带电,并能在电场中移动到电场的正极或负极。根据支持物的不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
3.透析:用透析袋从小分子化合物中分离大分子蛋白质的方法。
4.色谱:
A.离子交换色谱(ion  exchange),它利用蛋白质的两性游离特性。在一定的ph值下,每种蛋白质的电荷量和性质是不同的,因此可以用离子交换色谱分离。如阴离子交换层析,先洗脱负电荷小的蛋白质。
B.分子筛,也叫凝胶过滤。小分子蛋白质进入毛孔,停留时间长,大分子蛋白质不能进入毛孔,直接流出。
5.超速离心:它可以用来分离和纯化蛋白质,以及确定蛋白质的分子量。密度和形态

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