1.提取
提取单宁最好使用新鲜原料,应立即提取,或冷冻保存或用丙酮浸泡。原料的干燥应在最短的时间内完成,以避免单宁在水分、阳光、氧气和酶的作用下变质。
提取:将药材粉碎,过筛,用95%乙醇冷浸或渗漉,提取液或渗漉液减压浓缩得到提取物。
2.分离
(1)溶剂法:一般用乙醚等低极性溶剂提取含单宁的水,除去低极性杂质,再用乙酸乙酯提取,得到相对纯净的单宁。或者将粗单宁溶于少量乙醇和乙酸乙酯中,逐渐加入乙醚使单宁沉淀。
(2)沉淀法:在含单宁的水溶液中分批加入明胶溶液,过滤沉淀物,用丙酮回流,单宁溶于丙酮,蛋白质不溶于丙酮。
(3)柱层析:广泛使用DiaionHP-20、ToyopearlHW-40、SephadexLH-20、MCIGelCHP-20作为固定相,水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮作为流动相(洗脱液)。
(4)高效液相色谱:高效液相色谱不仅对单宁有很好的分离效果,还可以用来判断单宁分子的大小,各成分的纯度,,-异构体等。简单、快速、准确、实用。
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